心血管疾患分子機構解明グループ

当研究室の概要

心血管疾患は直接生命を脅かすために、これまでに発症後の診断法・治療法が盛んに研究されてきました。しかしながら、日々の生活習慣に関連した諸基礎疾患（高血圧、糖尿病、高脂血症、肥満など）が知らない間に病気の素因を作り上げていることは、循環器疾患も例外ではありません。また、病気の予防を重視することは、本人の健康のみならず、社会全体の健康福祉につながる重要な視点です。
当グループでは、まず、日常臨床で遭遇する疑問を分子レベルに翻訳することから開始します。そして心血管疾患の分子機構を、精緻な実験系を構築して明らかにしようとしています。

実際には
1.Gene-Trap法
2.Functional cloning法
3.Signal sequence trap法
4.miRNA機能解析
を用いて、新たな疾患関連遺伝子の解析を行っています。
また、複数のグループと共同して、虚血のイメージング、およびターゲッティング、また心臓の再生研究にも取り組んでいます。

1.Gene-Trap法

レトロウイルスには、ある程度ランダムにゲノム遺伝子に入り込む性質があります。その性質を応用して、遺伝子の挿入によるさまざまな変異を受けた細胞を作りだすことが出来ます。これらの細胞において、本来持っているはずの機能が消失（変化）した際には、その遺伝子変異が原因になっているのではないかと推測することができます（Ono-K et al. Mol Cell Biol.2001; 21:8276-88, Ono-K et al. Mol Cell Biol.2003; 23:665-76）。

この方法においては、ランダムな遺伝子変異を対象とするために、思いもかけないような遺伝子が病気の候補遺伝子として得られる可能性があります。これまでに、この手法を脂肪細胞分化に必要な遺伝子のスクリーニングに応用しました（Horie-T et al. J Lipid Res. 2008;49:1224-34）。

2.Functional cloning法

上記のGene-Trap法もFunctional cloning法の一つですが、細胞の機能変化に着目した手法で疾患の原因遺伝子の検索を行っています。インスリンやその他の刺激を受けると細胞は糖を取り込みます。その時に中心的な働きをするのが、糖輸送担体Glucose transporter(GLUT)4です。

我々はこれまでにGLUT4の細胞内から細胞膜表面への移動（GLUT4トランスロケーション）を定量するためのレポーター遺伝子を作製し、心筋細胞でのGLUT4トランスロケーションに関わるシグナル伝達経路を調べてきました（Horie-T et al. J Cell Physiol. 2008;215:733-42.）。

このシグナル伝達経路を担うキナーゼのドミナントネガティブ体のトランスジェニックマウスの解析を通じて、圧負荷に応じて心機能が保持される機構も明らかとなってきました。

一方、糖尿病、あるいはその前段階においては、インスリンが働きにくくなる状態がおきます（インスリン抵抗性）。インスリン抵抗性の状態では、GLUT4トランスロケーションが低下しますので、FACS解析を基にしたセルソーティングを組み合わせて、GLUT4トランスロケーションを低下させるような働きを持つ遺伝子を、心臓のcDNAライブラリーからスクリーニングしています。

1. cDNAライブラリー（human heart 由来）をレトロウイルスベクターに組み込み、レポーター遺伝子を持つ細胞に感染させる。
2. インスリン刺激後の右下の三角の部分の細胞（インスリンによってGLUT4のトランスロケーションが起きない）あるいは左上の部分（過剰にtranslocationが起きる）をセルソーターで複数回分離する。
3. ゲノムDNAをとり、PCRでレトロウイルスによって組み込まれた遺伝子（GLUT4のトランスロケーションを阻害する因子あるいは促進する因子）を確認する。
4. 培養細胞系に得られた遺伝子を過剰発現、あるいはノックダウンして因果関係を確認する。

3.Signal sequence trap法

生理的刺激を受けた際、あるいは病的状態において細胞から放出されるような因子（分泌因子）は、血中で測定できますので、病気の診断に使える可能性があります。また、多くの場合、分泌因子は受容体という受け手に結合して作用を発揮しますので、受容体との結合を阻害することは薬の開発につながります。

多くの分泌因子、あるいはⅡ型の膜蛋白はシグナルペプチドという仕組みを持っています。現在、CD2-NEOを発現するレトロウイルスベクター（シグナルペプチドを持つ遺伝子に、このレトロウイルスが挿入された場合に、薬剤耐性の獲得と同時に細胞表面にマーカー遺伝子を出現させる）を用いて、心筋細胞において、ATPが低下するような代謝障害が生じた際に分泌される因子のクローニング、解析を行っています。

シグナルペプチドを持つ遺伝子にU3-CD2-NEOが挿入された場合、その細胞は薬剤耐性になると同時に細胞表面にCD2が出てくる。このCD2に対する抗体によって細胞を選択する。疾患マーカーを得ることを目標として、さまざまな刺激に応じて心筋細胞から分泌が開始されるような遺伝子のスクリーニングを行っている。

4.miRNA機能解析

ほ乳類のトランスクリプトームの総合解析により予想をはるかに超えた23218個（全RNAの52%）のNon-coding RNAが存在することが明らかになっています。その中でもmiRNAは転写/翻訳レベルで様々な遺伝子の発現を調節していることが明らかとなってきました。miRNAが発生・分化に重要な役割を果たしていることは既に知られていますが、成体での機能解明は不十分でした。

我々は、miRNA発現プロファイリング、および組織特異的miRNA発現ライブラリーを作製することにより、心血管疾患におけるmiRNAの役割解明に着手しています。組織特異的遺伝子欠損マウス、miRNAノックアウトマウスも利用し、成体での機能解析につなげていく予定です。

1. Kuwabara Y, Ono K, Horie T, Nishi H, Nagao K, Kinoshita M, Watanabe S, Baba O, Kojima Y, Shizuta S, Imai M, Tamura T, Kita T, Kimura T. Increased microRNA-1 and microRNA-133a Levels in Serum of Patients with Cardiovascular Disease Indicate the Existence of Myocardial Damage. Circulation: Cardiovascular Genetics. 2011;4:446-454.

2. Wada H, Ura S, Satoh-Asahara N, Kitaoka S, Mashiba S, Akao M, Abe M, Ono K, Morimoto T, Fujita M, Shimatsu A, Takahashi Y, Hasegawa K. α1-Antitrypsin-low-density-lipoprotein Serves as a Marker of Smoking-specific Oxidative Stress. J Atheroscler Thromb 2011 in press.

3. Morikami Y, Ono K, Jinnai T, Tamura T, Watanabe S, Takai F, Osada H, Yamazaki K, Kita T, Sakata R, Kimura T. A case with giant right coronary artery aneurysm in a patient with Behcet’s disease. Journal of Cardiology Cases 2011 in press.

4. Natsuaki M, Furukawa Y, Morimoto T, Nakagawa Y, Akao M, Ono K, Shioi T, Shizuta S, Sakata R, Okabayashi H, Nishiwaki N, Komiya T, Suwa S, Kimura T. Impact of diabetes on cardioavascular outcomes in hemodialysis patients undergoing coronary revascularization. Circ J. 2011 ;75:1616-25.

5. Ono K. MicroRNA links obesity and impaired glucose metabolism. Cell Res. 2011;21:864-6.

6. Shiomi H, Tamura T, Niki S, Tada T, Tazaki J, Toma M, Ono K, Shioi T, Morimoto T, Akao M, Furukawa Y, Nakagawa Y, Kimura T. Inter- and Intra-Observer Variability for Assessment of the Synergy Between Percutaneous Coronary Intervention With TAXUS and Cardiac Surgery (SYNTAX) Score and Association of the SYNTAX Score With Clinical Outcome in Patients Undergoing Unprotected Left Main Stenting in the Real World. Circ J. 2011 75:1130-7.

7. Kanamori H, Takemura G, Goto K, Maruyama R, Ono K, Nagao K, Tsujimoto A, Ogino　A, Takeyama T, Kawaguchi T, Watanabe T, Kawasaki M, Fujiwara T, Fujiwara H,　Seishima M, Minatoguchi S. Autophagy limits acute myocardial infarction induced by permanent coronary artery occlusion. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2011 in press.

8. Ono K, Kuwabara Y, Han J. MicroRNAs and Cardiovascular Diseases. FEBS J 2011;278:1619-33.

9. Tada T, Kimura T, Morimoto T, Ono K, Furukawa Y, Nakagawa Y, Nakashima H, Ito A, Shiode N, Namura M, Inoue N, Nishikawa H, Nakao K, Mitsudo K Comparison of Three-Year Clinical Outcomes after Sirolimus-eluting Stent Implantation among　Insulin-treated Diabetic, Non-insulin-treated Diabetic and Non-diabetic Patients From the j-Cypher　Registry Am J Cardiol 2011 in press.

10. Nishi H, Ono K, Horie T, Nagao K, Kinoshita M, Kuwabara Y, Watanabe S, Takaya T, Tamaki Y, Takanabe-Mori R, Wada H, Hasegawa K, Iwanaga Y, Kawamura T, Kita T, Kimura T. MicroRNA-27a regulates beta cardiac myosin heavy chain gene expression by targeting thyroid hormone receptor beta 1 in neonatal rat ventricular myocytes. Mol Cell Biol. 2011;31:744-55.

11. Kaishi S, Takaya T, Morimoto T, Sunagawa Y, Kawamura T, Ono K, Shimatus A, Baba S. Heiki T, Nakahata T, Hasegawa K. Cyclin-dependent kinase 9 forms a complex with GATA4 and is involved in the differentiation of mouse ES cells into cardiomyocytes Am J Cell Physiol. 2011;226:248-54.

12. Watanabe S, Tamura T, Ono K, Horiuchi H, Kimura T, Kita T, Furukawa Y. Insulin-like growth factor axis (insulin-like growth factor-I/insulin-like growth factor-binding protein-3) as a prognostic predictor of heart failure: association with adiponectin. Eur J Heart Failure 2010;12:1214-22.

13. Horie T, Ono K, Horiguchi M, Nishi H, Nakamura T, Nagao K, Kinoshita M, Kuwabara Y, Marusawa H, Iwanaga Y, Hasegawa K, Yokode M, Kimura T, Kita T. MicroRNA-33 encoded by an intron of Srebp2 regulates HDL in vivo Proc Natl Acad Sci U S A. 2010;107:17321-6.

14. Kinoshita M, Ono K, Horie T, Nagao K, Nishi H, Kuwabara Y, Takanabe-Mori R, Hasegawa K, Kita T, and Kimura T. Regulation of adipocyte differentiation by activation of serotonin (5-HT) receptors 5-HT2AR and 5-HT2CR and involvement of microRNA-448-mediated repression of KLF5. Molecular Endoclinology. 2010;24:1978-87.

15. Takanabe-Mori R, Ono K, Sowa N, Takaya T, Horie T, Satoh-Asahara N, Shimatsu A, Fujita M, Sawamura T, Hasegawa K. LOX-1 is required for the adipose tissue expression of proinflammatory cytokines in high-fat diet-induced obese mice. Biochem Biophys Res Commun 2010;398:576-80.

16. Kaichi S, Hasegawa K, Takaya T, Yokoo N, Mima T, Kawamura T, Morimoto T, Ono K, Baba S, Doi H, Yamanaka S, Nakahata T, Heike T. Ｃell line-dependent differentiation of induced pluripotent stem cells into cardiomyocytes in mice. Cardiovasc Res. 2010;88:314-23.

17. Horie T, Ono K, Nishi H, Nagao K, Kinoshita M, Watanabe S, Kuwabara Y, Nakashima Y, Takanabe-Mori R, Nishi E, Hasegawa K, Kita T, Kimura T. Acute Doxorubicin Cardiotoxicity Is Associated with miR-146a-induced Inhibition of the Neuregulin-ErbB Pathway Cardiovascular Res 2010;87:656-664.

18. Wada H, Shinjo D, Kameda S, Ono K, Satoh N, Morimoto T, Osakada G, Nakano T, Fujita M, Shimatsu A, Hasegawa K. Transmitral E/A ratio decreases in association with abdominal fat accumulation in patients with impaired glucose tolerance or mild diabetes without left ventricular hypertrophy. Heart Vessels. 2010;25:45-50.

19. Nishi H, Ono K, Iwanaga Y, Horie T, Nagao K, Takemura G, Kinoshita M, Kuwabara Y, Takanabe Mori R, Hasegawa K, Kita T, Kimura T. MicroRNA-15b modulates cellular ATP levels and degenerates mitochondria via ARL2 in neonatal rat cardiac myocytes. J Biol Chem. 2010;285:4920-30.

20. Nagao K, Ono K, Iwanaga Y, Tamaki Y, Kojima Y, Horie T, Nishi H, Kinoshita M, Kuwabara Y, Hasegawa K, Kita T, Kimura T. Neural cell adhesion molecule is a cardioprotective factor up-regulated by metabolic stress. Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 2010;48:1157-68.

21. Wada H, Satoh N, Kitaoka S, Ono K, Morimoto T, Kawamura T, Nakano T, Fujita M, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K. Soluble VEGF receptor-2 is increased in sera of subjects with metabolic syndrome in association with insulin resistance. Atherosclerosis 2010;208:512-517.

22. Ono K, Wang X, Kim SO, Armstrong LC, Bornstein P, Han J. Metaxin deficiency alters mitochondrial membrane permeability and leads to resistance to TNF-induced cell killing. Protein Cell 2010;1:161-173.

23. Tada T, Fujita M, Goto T, Tamura T, Ono K, Kita T, Takahashi K, Nagata H, Sakata R, Kimura T: A case with sudden onset of position-dependent hypoxemia caused by reopening of foramen ovale. Journal of Cardiology Cases 2010;1:e88-e91.

24. Nakashima Y, Ono K, Yoshida Y, Kojima Y, Kita T, Tanaka M, Kimura T. The search for Nkx2-5-regulated genes using purified embryonic stem cell-derived cardiomyocytes with Nkx2-5 gene targeting. Biochem Biophys Res Commun.2009;390:821-6.

25. Horie T, Ono K, Nishi H, Iwanaga Y, Nagao K, Kinoshita M, Kuwabara Y, Takanabe R, Hasegawa K, Kita T, Kimura T. MicroRNA-133 regulates the expression of GLUT4 by targeting KLF15 and is involved in metabolic control in cardiac myocytes. Biochem Biophys Res Commun.2009;389:315-20.

26. Jinnai T, Horiuchi H, Makiyama T, Tazaki J, Tada T, Akao M, Ono K, Hoshino K, Naruse Y, Takahashi K, Watanabe H, Kita T, Kimura T. Impact of CYP2C19 Polymorphisms on the Antiplatelet Effect of Clopidogrel in an Actual ClinicalSetting in Japan. Circ J. 2009;73:1498-503.

27. Takaya T, Ono K, Kawamura T, Takanabe R, Kaichi S, Morimoto T, Wada H, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K. MicroRNA-1 and MicroRNA-133 in Spontaneous Myocardial Differentiation of Mouse Embryonic Stem Cells. Circulation J. 2009;73:1492-7.

28. Kojima Y, Ono K, Inoue K, Takagi Y, Kikuta K-I, Nishimura M, Yoshida Y, Nakashima Y, Matsumae H, Furukawa Y, Mikuni N, Nobuyoshi M, Kimura T, Kita T, Tanaka M. Progranulin Expression in Advanced Human Atherosclerotic Plaque Atherosclerosis. 2009;206:102-108.

29. Sugimoto M, Arai H, Tamura Y, Murayama T, Khaengkhan P, Nishio T, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Ueda Y, Kita T, Harada S, Kamei K, Yokode M. Mulberry leaf ameliorates the expression profile of adipocytokines by inhibiting oxidative stress in white adipose tissue in db/db mice. Atherosclerosis. 2009;204:388-94.

30. Tamura Y, Sugimoto M, Murayama T, Ueda Y, Kanamori H, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Kita T, Yokode M, Arai H. Inhibition of CCR2 Ameliorates Insulin Resistance and Hepatic Steatosis in db/db Mice. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2008;28:2195-201.

31. Takanabe R, Ono K, Abe Y, Takaya T, Horie T, Wada H, Kita T, Satoh N, Shimatsu A, Hasegawa K. Up-regulated expression of microRNA-143 in association with obesity in adipose tissue of mice fed high-fat diet. Biochem Biophys Res Commun. 2008;376:728-32.

32. Maruyama R, Goto K, Takemura G, Ono K, Nagao K, Horie T, Tsujimoto A, Kanamori H, Miyata S, Ushikoshi H, Nagashima K, Minatoguchi S, Fujiwara T, Fujiwara H. Morphological and biochemical characterization of basal and starvation-induced autophagy in isolated adult rat cardiomyocytes. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2008;295:H1599-607.

33. Wada H, Abe M, Ono K, Morimoto T, Kawamura T, Takaya T, Satoh N, Fujita M, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K. Statins activate GATA-6 and induce differentiated vascular smooth muscle cells. Biochem Biophys Res Commun. 2008;374:731-6.

34. Takaya T, Kawamura T, Morimoto T, Ono K, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K. Identification of p300-targeted acetylated residues in GATA-4 during hypertrophic responses in cardiac myocytes. J Biol Chem. 2008;283:9828-35.

35. Matsumae H, Yoshida Y, Ono K, Togi K, Inoue K, Furukawa Y, Nakashima Y, Kojima Y, Nobuyoshi M, Kita T, Tanaka M. Inhibition of CCN1 suppressed neointimal hyperplasia in a rat balloon injury model. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2008;28:1077-83.

36. Satoh N, Wada H, Ono K, Yamakage H, Yamada K, Nakano T, Hattori M, Shimatsu A, Kuzuya H, Hasegawa K. Small dense LDL-cholesterol relative to LDL-cholesterol is a strong independent determinant of hypoadiponectinemia in metabolic syndrome. Circulation J 2008;72:932-9.

37. Horie T, Ono K, Kinoshita M, Nishi H, Nagao K, Kawamura T, Abe Y, Wada H, Shimatsu A, Kita T, Hasegawa K. TG-interacting factor is required for the differentiation of preadipocytes. J Lipid Res. 2008;49:1224-34.

38. Horie-T, Ono-K, Nagao-K, Nishi-H, Kinoshita-M, Kawamura-T, Wada-H, Shimatsu-A, Kita-T, Hasegawa-K. Oxidative stress induces GLUT4 translocation by activation of PI3-K/Akt and dual AMPK kinase in cardiac myocytes. J Cell Physiol. 2008;215:733-42.

39. Abe Y, Ono K, Kawamura T, Wada H, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K. Leptin induces elongation of cardiac myocyte and causes eccentric left ventricular dilatation with compensation. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2007;292:H2387-96.

40. Tamura T, Furukawa Y, Taniguchi R, Sato Y, Ono K, Horiuchi H, Nakagawa Y, Kita T, Kimura T. Serum adiponectin level as an independent predictor of mortality in patients with congestive heart failure. Circ J. 2007;71:623-30.

41. Hosseinkhani M, Hasegawa K, Ono K, Kawamura T, Takaya T, Morimoto T, Wada H, Shimatsu A, Prat SG, Suemori H, Nakatsuji N, Kita T. Trichostatin A induces myocardial differentiation of monkey ES cells. Biochem Biophys Res Commun. 2007;356:386-91.

42. Yoshida Y, Togi K, Matsumae H, Nakashima Y, Kojima Y, Yamamoto Y, Ono K, Nakamura T, Kita T, Tanaka M. CCN1 protects cardiac myocytes from oxidative stress via β1 integrin?Akt pathway. Biochem Biophys Res Commun. 2007;355:611-8.

1. Watanabe S, Tamura T, Ono K, Kita T, Kimura T, Furukawa Y: IGF axis and adiponectin as prognostic markers of patients with congestive heart failure.

1. Nishi H, Ono K, Horie T, Kinoshita M, Nagao K, Iwanaga Y, Hasegawa K, Kita T: Upregulation of microRNA targeting retionoid X receptor a contributes to development of cardiachypertrophy.
2. Horie T, Ono K, Kinoshita M, Nishi H, Nagao K, Mori R, Iwanaga Y, Hasegawa K, Kita T: MicroRNA-133 regulates the expression of GLUT4 by targeting KLF15 and is involved in metabolic control in cardiac myocytes.
3. Takaya-T, Kawamura T, Ono K, Takanabe R, Kaichi S, Kita T, Wada H, Morimoto T, Shimatsu A, Hasegawa K: Overexpression of microRNA-1 in mouse embryonic stem cells represses myocardial differentiation.
4. Wada H, Satoh N, Ono K, Shinjo D, Morimoto T, Nakano T, Shimatsu A, Fujita M, Hasegawa K: A soluble VEGF receptor-2 is a possible novel biomarker of cardiovascular risk in the metabolic syndrome.
5. Kaichi S, Takaya T, Sunagawa Y, Kawamura T, Ono K, Morimoto T, Kita T, Baba S, Hidaka K, Morisaki T, Heike T, Nakahata T, Shimatsu A, Hasegawa K: Cyclin-dependent kinase-9 is required for the differentiation of mouse ES cells into cardiac myocytes.

1. 尾野　亘、堀江貴裕、西　仁勇、長央和也、木下美菜子、北　徹：microRNAをターゲットとした肥満に伴う心血管系疾患治療法の開発
   

1. 堀江貴裕、尾野　亘、西　仁勇、長央和也、木下美菜子、森　利依子、岩永善高、長谷川浩二、北　徹：miR-133は心筋細胞における代謝調節においてKLF15をターゲットとしてGLUT4の発現を制御している
2. 西　仁勇、尾野　亘、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、岩永善高、森　利依子、長谷川浩二、北　徹：miR-27aはラット心筋細胞においてミオシン重鎖の発現を制御する
3. 高谷智英、川村晃久、尾野　亘、高鍋利依子、鶏内伸二、馬場志郎、平家俊男、中畑龍俊、森本達也、北　徹、島津　章、長谷川浩二：microRNA-1の過剰発現はマウスＥＳ細胞の心筋分化を抑制する

1. Nagao K, Ono K, Horie T, Nishi H, Kinoshita M, Hasegawa K, Kita T: Trapping genes that encode secreted and transmembrane proteins in H9C2 cardiomyoblasts.

1. Ono K, Horie T, Abe Y, Kawamura T, Kinoshita M, Nishi H, Nagao K, Satoh N, Shimatsu A, Kita T, Hasegawa K: Serotonin in adipose tissue acts as an autocrine factor required for adipocyte differentiation and lipolysis.
2. Horie T, Ono K, Abe Y, Kawamura T, Shimatsu A, Kita T, Hasegawa K : Activation of smad transcriptional coreppressor TGIF by insulin is required for adipocyte differentiation.
3. Horie T, Ono K, Iwanaga Y, Nishi H, Nagao K, Kinoshita M, Mori R, Hasegawa K, Kita T: MicroRNA-133 regulates the expression of CPT-1b and GLUT4 by targeting SRF and KLF15 and is involved in metabolic control in cardiac myocytes.
4. Horie T, Ono K, Abe Y, Kawamura T, Wada H, Kinoshita M, Nagao K, Nishi H, Shimatsu A, Kita T, Hasegawa K: Oxidative stress induces GLUT4 translocation by dual AMPK kinase activation in cardiac myocytes.
5. Nishi H, Ono K, Iwanaga Y, Horie T, Kinoshita M, Nagao K, Mori R, Hasegawa K, Kita T: MicroRNA-206 controls cardiac myosin heavy chain gene expression by targeting RXR-?.
6. Takaya-T, Kawamura T, Ono K, Mori R, Kaichi S, Kita T, Wada H, Morimoto T, Shimatsu A, Hasegawa K: Roles of muscle-specific microRNAs during differentiation of mouse embryonic stem cells into cardiac myocytes.
7. Sugimoto M, Arai H, Tamura Y, Murayama T, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Kita T, Kamei K, Yokode M: Mulberry leaf ameliorates the production of adipocytokines by inhibiting oxidative stress in white adipose tissue in db/db mice.
8. Kaichi S, Takaya T, Morimoto T, Sunagawa Y, Kawamura T, Ono K, Kita T, Hidaka K, Morisaki T, Baba S, Heike T, Nakahata T, Hasegawa K: Cyclin-dependent kinase-9, as a novel component of p300/GATA4 complex, is involved in the differentiation of mouse ES cells into cardiac myocytes.
9. Tamaki Y, Iwanaga Y, Niizuma S, Kawashita T, Kato T, Inuzuka Y, Ono K, Shioi T, Kita T: Chronic administration of endogenous inotropic peptide, apelin, prevents left ventricular remodeling and improves survival in hypertensive rats with heart failure.
10. Tamura Y, Arai H, Sugimoto M, Murayama T, Ueda Y, Kanamori H, Ono K, Ariyasu H, Akamizu T, Kita T, Yokode M: C-C chomokine receptor-2 inhibitor ameliorates insulin resistance and hepatic steatosis in db/db mice.

1. Ono K, Horie T, Takanabe R, Kinoshita M, Nishi H, Nagao K, Kita T, Hasegawa K: Enkephalin is required for adipocyte differentiation and is involved in impaired glucose tolerance in rat model of typeII diabetes.
2. Horie T, Ono K, Kita T, Hasegawa K : Activation of TG-interacting factor by insulin regulates adipocyte differentiation.
3. Horie T, Ono K, Wada H, Kita T, Hasegawa K: Oxidative stress induces GLUT4 translocation by dual AMPK kinase activation in cardiac myocytes.
4. Horie T, Ono K, Nishi H, Nagao K, Kinoshita M, Hasegawa K, Kita T: MicroRNA-133 controls GLUT4 expression by targeting KLF15 in cardiac myocytes.
5. Kinoshita M, Ono K, Horie T, Nagao K, Nishi H, Hasegawa K, Kita T: Functional cloning of the genes which regulates GLUT4 trafficking in cardiac myocytes.
6. Nagao K, Ono K, Horie T, Nishi H, Kinoshita M, Hasegawa K, Kita T : Trapping of genes that encode secreted and transmembrane proteins in H9C2 cardiomyocytes.
7. Nishi H, Ono K, Iwanaga Y, Horie T, Kinoshita M, Nagao K, Mori R, Hasegawa K, Kita T: MicroRNA-206 controls cardiac myosin heavy chain gene expression by targeting RXR-?.
8. akanabe R, Ono K, Takaya T, Horie T, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K: Up-regulated expression of microRNA-143 in the adipose tissue of high-fat died-induced obese mice.
9. Takaya-T, Kawamura T, Ono K, Takanabe R, Kaichi S, Kita T, Wada H, Morimoto T, Shimatsu A, Hasegawa K: Regulated expression of microRNAs during differentiation of mouse embryonic stem cells into cardiac myocytes.
10. Wada H, Satoh N, Ono K, Shinjo D, Morimoto T, Kawamura T, Nakano T, Yamada K, Shimatsu A, Fujita M, Hasegawa K: Serum levels of soluble Flk-1, an endogenous inhibitor of VEGF, are decreased by weight reduction therapy in male obese patients.
11. Tamura T, Furukawa Y, Ono K, Kimura T, Kita T: Serum adiponectin level predicts mortality and inversely correlates to insulin-like growth factor axis in patients with congestive heart failure.
12. Wada H, Shinjo D, Ono K, Satoh N, Morimoto T, Kawamura T, Nakano T, Shimatsu A, Fujita M, Hasegawa K: Soluble Flk-1, an endogenous inhibitor of vascular endothelial growth factor is increased in serum of smoking man.
13. Takaya T, Kawamura T, Morimoto T, Ono K, Kita T, Shimatsu A, Hasegawa K: A GATA-4 mutant lacking p300-induced acetylation suppresses myocardial cell hypertrophy.
14. Kaichi S, Takaya T, Morimoto T, Sunagawa Y, Kawamura T, Ono K, Kita T, Hidaka K, Morisaki T, Baba S, Heike T, Nakahata T, Hasegawa K: Cyclin-dependent kinase-9, as a novel component of p300/GATA4 complex, is involved in the differentiation of mouse ES cells into cardiac myocytes.

1. Horie T, Ono K, Wada H, Kita T, Hasegawa K: Oxidative stress induces GLUT4 translocation by dual AMPK kinase activation in cardiac myocytes.
2. Nagao K, Ono K, Horie T, Nishi H, Kinoshita M, Hasegawa K, Kita T: Trapping of genes that encode secreted and transmembrane proteins in H9C2 cardiomyocytes.
3. Nishi H, Ono K, Iwanaga Y, Horie T, Kinoshita M, Nagao K, Mori R, Hasegawa K, Kita T: MicroRNAs control expression of ? and?? myosin heavy chain genes in cardiac myocytes.

1. 西　仁勇、尾野　亘、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：miR-206は心臓において????MHC発現を制御する
2. 長央和也、尾野　亘、西　仁勇、木下美菜子、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：ラット心筋芽細胞H9C2におけるI型膜蛋白、分泌蛋白の検索

1. 堀江貴裕、尾野　亘、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：心筋細胞において酸化ストレスに対するGLUT4トランスロケーションは2つのAMPKキナーゼによって制御されている

1. 尾野　亘、堀江貴裕、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：レトロウイルスによる遺伝子トラップ法を用いた脂肪細胞分化に関わる遺伝子の同定
2. 西　仁勇、尾野　亘、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：miR-206は心臓においてα/β-MHC発現を制御する
3. 木下美菜子、尾野　亘、堀江貴裕、西　仁勇、長央和也、長谷川浩二、北　徹：心筋細胞におけるGLUT4トランスロケーションに関わる遺伝子の検索
4. 堀江貴裕、尾野　亘、木下美菜子、長央和也、堀江貴裕、長谷川浩二、北　徹：心筋細胞において酸化ストレスに対する早期のGLUT4トランスロケーションは２つのAMPKキナーゼによって制御されている